鱼谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书 仅供科研使用,不得用于医学诊断。 使用前仔细阅读本说明书。 用途: 用于定量检测鱼血清、血浆及相关液体样本中谷氨酸脱氢酶 (GDH/GLDH)的含量。 工作原理 本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法(ELISA),测定样品中鱼谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)的水平。向预先包被鱼谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和HRP 标记的谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)抗体,经过温育和洗涤,去除未结合的组分,然后再加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅与样品中鱼谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)的浓度呈正相关。 试剂盒组成 1 标准品(10U/L) 0.5ml 7 显色剂A 液6ml 2 标准品稀释液6mL 8 显色剂B 液6ml 3 酶标包被板12 孔×8 条9 终止液6ml 4 酶标试剂6ml 10 说明书1 份 5 20×浓缩洗涤液25ml 11 封板膜2 张 6 样品稀释液6ml 12 密封袋1 个 注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:10、5、2.5、1.25、0.625、0 U/L 更多相关产品》》》 人血纤肽/纤维蛋白肽Belisa试剂盒 未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1Elisa试剂盒 人硫氧还蛋白还原酶elisa试剂盒 人脂肪酶elisa试剂盒 人T细胞受体elisa试剂盒 嗜环蛋白/亲环素B测试盒 人胆固醇酯转移蛋白elisa试剂盒 脂肪酸结合蛋白测试盒 LTB Elisa试剂盒 牛乳糖合成酶elisa试剂盒 人丙酮酸激酶M2型同工酶elisa试剂盒 Ⅷ-Ag Elisa试剂盒 表面膜免疫球蛋白M测试盒 人血小板相关补体3elisa试剂盒 人膜桥蛋白elisa试剂盒 人丙酮酸激酶M2型同工酶elisa试剂盒 人凝血因子ⅩⅢelisa试剂盒 人FMS样酪氨酸激酶3elisa试剂盒 人糖化白蛋白elisa试剂盒 PTK/CD115 Elisa试剂盒 需要而未提供的试剂和器材www.hfswsj.com
1. 37℃恒温箱。 2. 标准规格酶标仪。 3. 精密移液器及一次性吸头 4. 蒸馏水, 5. 一次性试管 6. 吸水纸 注意事项 1. 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30 分钟。酶标包被板开封后如未用完, 板条应装入密封袋中保存。 2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差 3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。 4. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 5. 为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。 6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 7. 底物B 对光敏感,避免长时间暴露于光下。 洗板方法 手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下 用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml 注入孔内,浸泡1-2 分钟。根据需 要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中 标本要求 1.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活 性。 2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实 验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 操作程序 1. 分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标 准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl;在酶标 包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样 品zui终稀释度为5 倍)。每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。轻轻晃动混 匀,37℃温育60 分钟。 2. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30 秒,甩去洗涤液,用吸 水纸拍干。如此重复5 次,拍干。 3. 每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光 显色15 分钟. 4. 取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 5. 测定:以空白孔调零,在450nm 波长下测量各孔的吸光度值(OD 值)。测 定应在加终止液后15 分钟以内进行。 6. 根据标准品的浓度及对应的OD 值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据 样品的OD 值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软 件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。 操作程序总结: 准备试剂,样品和标准品 加入准备好的样品、标准品和酶标试剂,37℃反应60分钟 洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟 加入终止液 15分钟之内读OD值 计算 检测范围:0.312 U/L -10U/L。 规格: 96T/盒 保存: 2-8℃ 有效期: 6 个月(2-8℃)。 |