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人前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒

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人前列腺素E2(PGE2)Elisa试剂盒/Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit本公司是国内外专业的Elisa试剂盒、抗体、生物试剂、培养基生产(供应)商,主营产品有:ELISA试剂盒、抗体、生物试剂、血清、培养基等,并可以销售订购国外品牌产品,并大量备有现货,咨询!
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人前列腺素E2(PGE2)Elisa试剂盒

Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit


货号:KB1161A

包装:96T/48T
检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
保存:2-8℃,6个月。

人前列腺素E2(PGE2)Elisa试剂盒说明书请来电索取!

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人前列腺素E2(PGE2)Elisa试剂盒供应商:

本公司是国内外专业的Elisa试剂盒、抗体、生物试剂、培养基生产(供应)商,主营产品有:ELISA试剂盒、抗体、生物试剂、血清、培养基等,并可以销售订购sigma、invitrogen、ABI、ATCC、gibco、abcam、cell signaling tech、R&D、hyclone等国外产品,并大量备有现货,咨询!

Elisa试剂盒 相关知识》》》

试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型
塑料膜板盖 1块 半块 即用型
标准品:800pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀
空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
生物素标记的抗IFN-γ抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。


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