人第八因子相关抗原(FⅧAg)Elisa试剂盒
Human Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA Kit
货号:KB1196A
包装:96T/48T 检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 保存:2-8℃,6个月。
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人第八因子相关抗原(FⅧAg)Elisa试剂盒供应商:
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试剂的准备 1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行: 800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 组织标本: 切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS ,缓冲液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀 浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 建议使用的实验方案 标准品浓度(mIU/ml) A 40 40 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 B 20 20 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 C 10 10 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 D 5.0 5.0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 E 2.5 2.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 F 1.25 1.25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 建议使用的实验方案 标准品浓度(mIU/ml) A 40 40 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 B 20 20 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 C 10 10 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 D 5.0 5.0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 E 2.5 2.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 F 1.25 1.25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品收集、处理及保存方法 1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液 5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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