人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)Elisa试剂盒
Human membrane IgA,mIgA ELISA Kit
货号:KB1637A
包装:96T/48T 检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 保存:2-8℃,6个月。
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人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)Elisa试剂盒供应商:
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法 保存:2-8℃ 样品类型(SAMPLE TYPES): 标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等 1ml的全血可得到0.5ml的血清 或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制 96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品:800pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型 生物素标记的抗IFN-γ抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型 洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释 底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型 标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型 试剂的准备 1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行: 800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 组织标本: 切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS ,缓冲液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀 浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 血浆: 应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。 尿液、胸腹水、脑脊液: 用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
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