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人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒

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人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)Elisa试剂盒/Human neutrophil elastase,NE ELISA Kit本公司是国内外专业的Elisa试剂盒、抗体、生物试剂、培养基生产(供应)商,主营产品有:ELISA试剂盒、抗体、生物试剂、血清、培养基等,并可以销售订购国外品牌产品,并大量备有现货,咨询!
  人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒的详细资料:

人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)Elisa试剂盒

Human neutrophil elastase,NE ELISA Kit


货号:KB1644A

包装:96T/48T
检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
保存:2-8℃,6个月。

人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)Elisa试剂盒说明书请来电索取!

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人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)Elisa试剂盒供应商:

本公司是国内外专业的Elisa试剂盒、抗体、生物试剂、培养基生产(供应)商,主营产品有:ELISA试剂盒、抗体、生物试剂、血清、培养基等,并可以销售订购sigma、invitrogen、ABI、ATCC、gibco、abcam、cell signaling tech、R&D、hyclone等国外产品,并大量备有现货,咨询!

Elisa试剂盒 相关知识》》》

试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
操作步骤:
参照说明书(具体说明书请发邮件::shkbsw)
灵敏度:
具体请查看说明书.
检测范围(RANGN):
具体请查看说明书.
结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为人Hp-IgM阴性
阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为人Hp-IgM阳性
血浆:
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液:
用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。



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