吐温20//TWEEN 20/0777-50L5. 终止反应:于各反应孔中加入2M**0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。1. 试剂 (1) 包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液): Na?CO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000mlelisa试剂盒组成及试剂配制:1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,600 pg/ml,将其稀释为400 pg/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。3. 样品稀释液:1×20ml。4. 检测稀释液A:1×10ml。5. 检测稀释液B:1×10ml。6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张12. 使用说明书:1份 抗原一般是指进入机体内的外来物质,如细菌、病毒、花粉等;抗原也可以是不同物种间的物质,如马的血清进入兔子的体内,马血清中的许多蛋白质就成为兔子的抗原物质;ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牵9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。
名称:吐温20 品牌:AMRESCO Item Description:TWEEN 20 Code:0777-50L 级别:试剂级 CAS: Size: Shipping Temperature: Hazardous Shipping Charges Apply*: Hazard Label for Container*: UN#*: UNSPSC #: Shelf Life from Date of Manufacture**: Parent Category: Child Category: Grade:
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相关知识>>>> 单克隆抗体是只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体,来自单个B淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。在一些测量程序中可使用有证标准物质,也可使用多种其他类型的工作标准,只要能符合测量目的的要求。有证标准物质必须严格遵守证书中给出的相应信息规范使用。选用有证标准物质与所用的分析测量方法密切相关。标准品,即标准物品,作为一种衡量标准;用做药物方面,则为含量测定中的标准含量。标准品包括化学计量标准品、冶金标准品和药检标准品。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在 IC50时的浓度,并按下列公式计算交叉反应率。有的企业在标准品(对照品)管理上还存在着登记着混乱、账物不相符、领用不规范、贮存条件不符合要求等问题。标准物质并不是*要求直接溯源至国家基准,标准物质溯源源头的正确选用取决于所溯源的参考标准是否有效。对于化学测量,量值溯源链的建立中还常常包括校准用纯物质(包括纯物质的溶液),应尽量选用具有溯源性保证的有证标准物质,使量值溯源到有证标准物质。 关键词: |