甲苯胺蓝O/92-31-9/TOLUIDINE BLUE O, CERTIFIED/E847-25G抗原的免疫剂量是依照给予动物的种类、免疫周期以及所要求的抗体特性等不同而不同。利用抗原-抗体反应原理,就是以一抗作为探针,它与目的蛋白作用并连接,再用带有荧光(或同位素)标记的二抗与一抗作用,zui后显色,发光位置就有目的蛋白。elisa用于检测未知抗体的间接法:用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照),于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。不*抗原,即半抗原(hapten)是只具有免疫反应性,而无免疫原性的物质,故又称不*抗原。
名称:甲苯胺蓝O 品牌:AMRESCO Item Description:TOLUIDINE BLUE O, CERTIFIED Code:E847-25G 级别:生物染料级 CAS:92-31-9 Size:25G Shipping Temperature:RT Hazardous Shipping Charges Apply*:No Hazard Label for Container*:NKH UN#*: UNSPSC #:12352200 Shelf Life from Date of Manufacture**:4 years Parent Category:Dyes & Stains Child Category:Colorometric Grade:CERTIFIABLE GRADE
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相关知识>>>> 抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化,包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段,以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化。elisa操作注意事项:试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。抗原是能使人和动物体产生免疫反应的一类物质,既能刺激免疫系统产生特异性免疫反应,形成抗体和致敏淋巴细胞,又能与之结合而出现反应。通常是一种蛋白质,但多糖和核酸等也可作为抗原。elisa加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。确认定值结果的溯源性和准确性,即建立标准物质定值结果的量值溯源链,在对定值方法溯源性的确认中,要着重控制溯源的源头。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体。 关键词: |