2D蛋白电泳指示染料//TRACKING DYE, 2D/M217-1MLelisa终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。在不可能的情况下,则应对所采用纯物质的纯度进行验证,如采用两组独立测试结果对其纯度进行验证分析;分别选取不同来源的同种化合物,对各自纯度值进行相互比对验证等。国家标准品及生物参考品系指用于鉴别、检查含量或效价测定的标准物质,其制备与标定应符合“生物制品国家标准物质制备和标定规程"要求,并由国务院药品监督管理部门的机构分发。企业工作标准品或参考品必须经国家标准品或参考品标化后方能使用。 elisa实验步骤:1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。
名称:2D蛋白电泳指示染料 品牌:AMRESCO Item Description:TRACKING DYE, 2D Code:M217-1ML 级别:蛋白组学级 CAS: Size:1ML Shipping Temperature:COLD Hazardous Shipping Charges Apply*:No Hazard Label for Container*:NONE UN#*: UNSPSC #:12352200 Shelf Life from Date of Manufacture**:2 years Parent Category:Protein Electrophoresis Child Category:Tracking Dyes & pH Indicators Grade:PROTEOMICS GRADE
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相关知识>>>> 在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。通过方法与实验室之间的测量预比对可以确认各方法与实验室在实验条件、操作程序方面已经得到了很好的控制,之间的*性较好。测量预比对通常采取与所研制标准物质基体相同或近似、浓度水平相近的另一份均匀样品来进行,而不能采取所研制的标准物质样品。elisa测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。体(antibody)指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。为了对样品的均匀性作zui终确认,应尽可能抽取不同的样品单元用于每一组定值测量。当协作研究的结果用于确认标准物质均匀性时,每个参与实验室则至少应测定三或四个单元。应根据方法确认中确定的各项实验条件及参数,开展测量工作。在标准物质研制阶段,做好各项测量实验条件及参数的记录是非常重要的,可为以后复制阶段的定值工作提供很好的依据。可以作为抗原的物质有很多种,一般的科研实验中,经常使用的抗原有:偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。 关键词: |